紫外分光光度計基本原理和紫外可見分光光度計分類

來源:林上科技   發(fā)布時間:2010/09/06 09:13  瀏覽:9855
紫外分光光度計基本工作原理是利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質,引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收,紫外可見分光光度計可分為三類。

紫外分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質,引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內,對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測量光譜可以進行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較,還能進行定量分析。

太陽光譜圖

紫外-可見分光光度計的類型很多,但可歸納為三種類型,即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。
? ? ? ?1、單光束分光光度計:經(jīng)單色器分光后的一束平行光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結構簡單,操作方便,維修容易,適用于常規(guī)分析。
? ? ? ?2、雙光束分光光度計:經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強度相等的兩束光,一束通過參比池,一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強度,此比值即為試樣的透射比,經(jīng)對數(shù)變換將它轉換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品池,還能自動消除光源強度變化所引起的誤差。
? ? ? ?3、雙波長分光光度計:由同一光源發(fā)出的光被分成兩束,分別經(jīng)過兩個單色器,得到兩束不同波長1和2 的單色光;利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池,然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng),最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值。對于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)分析,以及存在背景干擾或共存組分吸收干擾的情況下,利用雙波長分光光度法,往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計,能獲得導數(shù)光譜。通過光學系統(tǒng)轉換,使雙波長分光光度計能很方便地轉化為單波長工作方式。如果能在1和2處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線,還能進行化學反應動力學研究。

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